實(shí)驗(yàn)室GC氣相色譜儀發(fā)展現(xiàn)狀分析

　　實(shí)驗(yàn)室GC氣相色譜儀是色譜法中zui古老的一種,但通過(guò)改進(jìn)填料的粒度及柱壓,在經(jīng)典的液相柱色譜的基礎(chǔ)上引入了氣相色譜的塔板理論,在技術(shù)上采用了高壓輸液泵,固定相和高靈敏度的檢測(cè)器,實(shí)現(xiàn)了分析速度快、分離效率高和操作自動(dòng)化,這種色譜技術(shù)被稱為液相色譜法（HighperformanceliquidchromatographyHPLC）。中藥的成分非常復(fù)雜,以往常用的薄層色譜等方法因其精密度、準(zhǔn)確度、靈敏度、重現(xiàn)性差而不能滿足現(xiàn)代中藥的需要。液相色譜正是以其穩(wěn)定、可靠、的特點(diǎn)成為中藥研究的zui重要的分析方法。目前液相色譜已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物堿、皂苷、黃酮、蒽醌、香豆素等各種中藥有效成分的測(cè)定。近年來(lái)對(duì)液相色譜監(jiān)測(cè)中藥的研究非常多,由于液相色譜集經(jīng)典液相色譜和氣相色譜的優(yōu)勢(shì)于一身,無(wú)論柱效、選擇性還是分析程度都達(dá)到或超過(guò)了它們,近年來(lái)對(duì)液相色譜的不足之處進(jìn)行了改進(jìn),使這項(xiàng)技術(shù)日臻完善。

　　實(shí)驗(yàn)室GC氣相色譜儀發(fā)展近況

　　實(shí)驗(yàn)室GC氣相色譜儀在藥物分析中的應(yīng)用,主要考慮試樣的預(yù)處理和分析柱、檢測(cè)器的選擇。在試樣的預(yù)處理上,日前興起的固相（微）萃取使得許多含量低的成分得到精制提純,從而適于液相色譜的測(cè)定,而孫新國(guó)采用逆流萃取測(cè)定川芎嗪含量取得了很好的效果。中藥中有些紫外吸收弱,或無(wú)特征紫外吸收的成分,直接用液相色譜測(cè)定,其靈敏度和分離度都不盡人意,利用柱前或柱后衍生化法可使這些成分較地測(cè)定出來(lái)。對(duì)于極性大、脂溶性差物質(zhì),在YWGCl8柱上不易保留,用十二烷基磺酸鈉作為離子對(duì)試劑,降低其極性,延長(zhǎng)柱上的保留時(shí)間,取得較好的分離較果。

　　將液相色譜和質(zhì)譜這兩個(gè)強(qiáng)有力的分析技術(shù)在線連接在一起,經(jīng)過(guò)三十年的發(fā)展已成為一項(xiàng)較為成熟的分析手段,但是它從形成伊始就存在著問(wèn)題:從液相色譜流進(jìn)質(zhì)譜時(shí),流動(dòng)相的變化、溶劑的組成、高溫高壓離子化的問(wèn)題制約著這種聯(lián)用技術(shù)發(fā)展,大氣壓離子化接口具有去除溶劑和離子化的雙重功效,它的引入,使得該技術(shù)在各個(gè)領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。電噴霧離子源是一種軟電離技術(shù),一般只生成（MH）和（M-H）-兩種分子離子峰,選擇性監(jiān)測(cè)（mz）190的負(fù)分子離子峰,具有較高的靈敏度、準(zhǔn)確度、專(zhuān)一性,滿足了低濃度藥物研究的需求。由張莉等人研究的三維液相色譜法可以同步測(cè)定葛根素和阿魏酸兩種指標(biāo)。

　　通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明:如果選擇合適的柱溫等色譜條件,乙醇作為反相液相色譜流動(dòng)相,分析中藥及中成藥中有效成分,既安全又準(zhǔn)確。結(jié)構(gòu)相似的物質(zhì),普通的檢測(cè)器難以檢測(cè)出來(lái),液相色譜-電化學(xué)法可以有效地測(cè)定黃連粉中僅差一個(gè)基團(tuán)的黃芩苷和黃芩素的含量。樣品經(jīng)色譜柱分離后收集,再經(jīng)熒光分光光度計(jì)測(cè)熒光強(qiáng)度,影響因素多,測(cè)定復(fù)雜,改進(jìn)后的液相色譜-熒光法則可以不經(jīng)衍生化和收集分離物,只經(jīng)化學(xué)處理除雜,濃縮后直接進(jìn)樣即可。用該法測(cè)定貫葉連翹中金絲桃素的含量也取得了較好的結(jié)果。液相色譜-示差折光測(cè)黃芪精口服液中黃芪甲苷的含量也都取得了較為滿意的結(jié)果。對(duì)于只有紫外末端吸收,用紫外檢測(cè)時(shí)靈敏度低,基線易漂移,示差折光檢測(cè)其易受外界條件干擾,蒸發(fā)散射檢測(cè)器能克服以上不足,響應(yīng)值只與樣品質(zhì)量有關(guān),其信號(hào)相應(yīng)與質(zhì)量成正比,不同化合物,質(zhì)量相同則信號(hào)相應(yīng)基本一致。

　　蒸發(fā)光散射檢測(cè)法是基于不揮發(fā)樣品分子對(duì)光的散射程度與其質(zhì)量成正比,與其所含基團(tuán)性質(zhì)無(wú)關(guān)。只要選擇適當(dāng)?shù)臋z測(cè)器參數(shù),便可使流動(dòng)相和溶劑*氣化,不產(chǎn)生信號(hào),而樣品中的各個(gè)組分以不揮發(fā)粒子存在,對(duì)光有散射,以被檢測(cè)出來(lái)。因此,蒸發(fā)光散射檢測(cè)器可用于含不同基團(tuán)的多組分同時(shí)分離、分析。和紫外、熒光等方法相比,蒸發(fā)光散射檢測(cè)法對(duì)不同物質(zhì)有近似相同的響應(yīng)因子。

　　因而不出現(xiàn)低濃度、高響應(yīng)或高濃度、低響應(yīng)的現(xiàn)象,有利于不同比例混合物的準(zhǔn)確測(cè)定.液相色譜-蒸發(fā)光散射檢驗(yàn)法測(cè)定銀杏葉中萜類(lèi)內(nèi)酯含量、紅參及育精膠囊中人參皂苷Rg1和Re的含量和藤黃中藤黃酸含量都得到了很好的結(jié)果。

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